Antecedentes/Objetivos-La patogénesis de la fibrosis pulmonar idiopática (FPI)/neumonía intersticial habitual (NIU), una enfermedad respiratoria humana crónica e incurable, no está bien establecida. Este estudio se diseñó para investigar si la apoptosis de los neumocitos de tipo II podría ser el factor precipitante en la patogénesis de la FPI.
Métodos: Se analizaron 19 muestras obtenidas mediante una revisión retrospectiva de los historiales médicos y patológicos de 55 pacientes con FPI, cuatro sujetos normales y 10 pulmones de control de la enfermedad. Las muestras seleccionadas presentaban alvéolos normales con cicatrices parcheadas en el parénquima pulmonar, que cumplían los criterios patológicos de la FPI. Para identificar las células individuales que sufrían apoptosis en los alvéolos normales, se realizó microscopía electrónica y etiquetado final in situ de ADN fragmentado en secciones embebidas en parafina utilizando digoxigenina-11-dUTP y la enzima desoxinucleotidil transferasa terminal.
Resultados: Se detectó apoptosis en los alvéolos normales de 17 de los 19 pacientes con FPI/FPIU y no se observó en los controles. La microscopía electrónica demostró cambios apoptóticos en los neumocitos de tipo II. Estos resultados indican que la muerte apoptótica de los neumocitos de tipo II se produce en los alvéolos normales de la FPI/FPIU y podría ser la causa principal de varios acontecimientos que explican las alteraciones histológicas, clínicas y funcionales observadas en la FPI/FPIU.
¿Qué tipo de célula es un neumocito?
Las células epiteliales alveolares (neumocitos) revisten el compartimento alveolar de los pulmones. Existen dos tipos de células alveolares: las de tipo I (el tipo predominante) y las de tipo II. Las células alveolares de tipo I son células escamosas extremadamente delgadas que intervienen en el proceso de intercambio gaseoso entre los alvéolos y la sangre.
Los neumocitos de tipo 1 son células alveolares que recubren la superficie alveolar. Los neumocitos de tipo 2 son células alveolares que secretan proteínas surfactantes para reducir la tensión superficial. Los neumocitos de tipo 1 son planos y delgados. Los neumocitos de tipo 2 tienen forma cúbica.
¿Qué son las células neumocitarias de tipo 2?
Los neumocitos de tipo II se identifican como las células sintetizadoras del surfactante alveolar, que tiene importantes propiedades en el mantenimiento de la estabilidad alveolar y de las vías respiratorias. El surfactante pulmonar puede reducir la tensión superficial y evitar el colapso alveolar y de las paredes de las vías respiratorias.
Neumocitos epitelio tipo 2
ResumenLas células alveolares de tipo II (ATII) desempeñan un papel clave como parte del epitelio pulmonar distal, incluyendo funciones en la respuesta inmunitaria innata y como progenitores autorrenovables para sustituir a las células alveolares de tipo I (ATI) durante la regeneración del epitelio alveolar. Su secreción de proteína surfactante ayuda a mantener la homeostasis en el pulmón distal y ejerce propiedades protectoras y antimicrobianas. A pesar de las funciones cruciales de estas células, sigue siendo difícil estudiarlas, en parte debido a métodos de aislamiento ineficaces y caros, a su propensión a diferenciarse en células alveolares de tipo I en cultivo y a su susceptibilidad al crecimiento excesivo de fibroblastos a partir de aislamientos primarios. Los métodos de aislamiento publicados suelen requerir tecnología especializada, lo que repercute negativamente en el desarrollo de modelos in vitro de enfermedades, incluida la tuberculosis bovina (TBB), una grave enfermedad reemergente tanto en animales como en humanos en todo el mundo. Presentamos aquí un método sencillo y rentable que puede utilizarse en la generación de células ATII primarias bovinas. En nuestros estudios, estas células muestran un fenotipo ATII en cultivos 2D y 3D y son propicias para seguir estudiando el papel de las células ATII en las enfermedades respiratorias bovinas.
Comprensión:- Los neumocitos de tipo II secretan una solución que contiene surfactante que crea una superficie húmeda en el interior de los alvéolos para evitar que los lados del alvéolo se adhieran entre sí reduciendo la tensión superficial.
Los alvéolos están recubiertos por una capa de líquido para crear una superficie húmeda que favorezca el intercambio gaseoso con los capilaresAunque este recubrimiento húmedo ayuda al intercambio gaseoso, también crea una tendencia a que los alvéolos se colapsen y se resistan al infladoLos neumocitos de tipo II secretan un líquido conocido como surfactante pulmonar que reduce la tensión superficial en los alvéolosLa función del surfactante en la regulación de la tensión superficial
Neumocitos tipo 1
Aquí describimos y comparamos varias características estructurales y funcionales de modelos simples que comprenden hAELVi o NCI-H441 mantenidos en cultivo en la interfase aire-líquido. A continuación describimos un modelo de co-cultivo consistente en una mezcla a partes iguales de las dos líneas celulares, presentamos medidas cuantitativas de la morfología del epitelio y describimos un artefacto inusual de este régimen de cultivo.
Para la construcción de los modelos, las membranas Transwell® (Corning 3460) se trataron con colágeno como se ha descrito anteriormente, y las células se sembraron a 1×105 células.cm-2. Las demás características del cultivo se mantuvieron inalteradas. Las demás características del cultivo se mantuvieron inalteradas. Por lo general, las células alcanzaron la confluencia total en una semana, según se determinó mediante una inspección visual minuciosa, tras lo cual se drenó el compartimento apical y se lavó con HBSS con calcio, magnesio y antibióticos añadidos (HBSS++) para eliminar las proteínas séricas del compartimento apical. A partir de ese momento, los modelos se cultivaron en la interfase aire-líquido, con suministro de medio sólo en el compartimento basal.
