Vía del dolor transducción, transmisión, modulación percepción
Todos los procedimientos quirúrgicos y experimentales fueron aprobados por el Comité Institucional para el Cuidado y Uso de Animales de Experimentación de la Facultad de Medicina de la Universidad de Jikei y se realizaron de acuerdo con las Directrices para la Realización Adecuada de Experimentos con Animales del Consejo Científico de Japón. El estudio del trazador se llevó a cabo con 32 ratas macho Sprague-Dawley (rango de peso, 280-310 g). Los animales fueron anestesiados con una inyección intraperitoneal (i.p.) de ketamina (30 mg/kg) y xilacina (24 mg/kg) y colocados en un instrumento estereotáxico para las inyecciones del trazador. En algunos casos, se administró adicionalmente isoflurano al 0,5% a través de una máscara nasal para obtener una profundidad de anestesia suficiente durante las inyecciones del trazador. Para el análisis disectorial del número de neuronas y áreas somales en el SNTC, se anestesió profundamente con uretano (1 g/kg i.p.) a cinco ratas macho Sprague-Dawley de 290-306 g de peso y se procesaron para inmunocitoquímica.
Tras la anestesia profunda con uretano, los animales fueron perfundidos transcardialmente con 50 mL de solución salina, seguidos de 300 mL de un fijador consistente en tampón fosfato 0,1 M que contenía paraformaldehído al 4%. Se extrajeron los cerebros y se postfijaron durante la noche en el mismo fijador, seguido de inmersión en sacarosa al 30% en tampón fosfato 0,1 M para crioprotección. Las secciones criostáticas (50 μm de grosor) se recogieron en serie en PBS.
¿Qué son las vías sensoriales ascendentes?
Los tractos ascendentes son vías sensoriales que comienzan en la médula espinal y se extienden hasta la corteza cerebral. Existen tres tipos de tractos ascendentes: el sistema columna dorsal-lemnisco medial, el sistema espinotalámico (o anterolateral) y el sistema espinocerebeloso.
¿Qué son las vías ascendentes y descendentes del dolor?
La vía ascendente, que transporta la información sensorial desde el cuerpo a través de la médula espinal hasta el cerebro, se define como vía ascendente, mientras que la vía descendente, que va desde el cerebro hasta los órganos reflejos a través de la médula espinal, se conoce como vía descendente.
Los fundamentos neurofisiológicos del dolor pueden dividirse en cuatro etapas: transducción, transmisión, modulación del dolor y percepción.
Vías ascendentes y descendentes del dolor
IntroducciónLas lesiones del funículo dorsal de la médula espinal seccionan las fibras sensoriales ascendentes que se originan en los ganglios de la raíz dorsal y terminan en el tronco encefálico, y también dañan el componente dorsal del tracto corticoespinal motor. Dirigirse a las columnas dorsales ascendentes (CD) es útil porque el marcaje transganglionar del nervio ciático permite evaluar el brote o la regeneración en una subpoblación específica de fibras marcadas, para lo cual puede confirmarse la integridad de la lesión en el tronco encefálico. Dado que se dirige a las fibras de las neuronas sensoriales primarias, es un modelo útil para estudiar el potencial de los factores intrínsecos a las neuronas para promover la regeneración de los axones. Se puede inducir a estas fibras a brotar más allá del borde distal de la lesión mediante una lesión de un nervio periférico (el efecto de lesión condicionante) [1-5]. El modelo también es atractivo porque se puede manipular la expresión génica en las neuronas sensoriales primarias (por ejemplo, mediante el uso de vectores virales adenoasociados [6-8]).
Aunque este modelo es muy adecuado para estudiar anatómicamente el brote o la regeneración de axones en el SNC, también es útil en un modelo de lesión medular para poder cuantificar los efectos sobre los déficits funcionales resultantes de una intervención experimental. Lo ideal sería que las pruebas funcionales adecuadas mostraran un déficit detectable y sostenido en los animales lesionados en comparación con los animales con lesión simulada, de modo que pudieran detectarse las mejoras funcionales resultantes de los tratamientos experimentales. Hasta ahora, el uso de pruebas funcionales con lesiones de transección de la CD ha sido bastante limitado, probablemente porque una lesión de transección de la CD provoca déficits funcionales leves que son transitorios y difíciles de detectar. Las pruebas desarrolladas para la nocicepción suelen estimular la retirada de la pata a través de circuitos locales de la médula espinal que se dejan intactos por una lesión de la columna dorsal. Los aferentes sensoriales que ascienden en la CD llevan información al tronco encefálico que comprende información táctil, tacto discriminativo, vibración y propiocepción [9]. Por lo tanto, las pruebas útiles para la vía ascendente de la columna dorsal deberían incluir tareas sensibles a estas funcionalidades sensoriales.
Detección, versatilidad y sensibilidad mejoradas para el análisis de subunidades de complejos proteicos y la caracterización biofarmacéutica con un rango de masas opcional ampliado hasta m/z 16.000.Demostración del rango de masas m/z 16.000 en la proteína purificada GroEL 800 kDa en un único barrido Orbitrap a una resolución de 7500 a m/z 200. Las funcionalidades básicas críticas incluyen mediciones de iones controladas por AGC compatibles con técnicas avanzadas de manipulación de iones, como ETD, PTCR, UVP, etc: ETD, PTCR, UVPD y CID/HCD.
Identifique con confianza una mayor parte del proteoma con los múltiples de enrutamiento iónico dual para aumentar la velocidad de escaneo en aplicaciones proteómicas. Cuantifique más muestras con la multiplexación TMTpro 18plex mediante adquisición inteligente con adquisición de datos de barrido más rápida para un mayor rendimiento de muestras, proteómica unicelular y modificaciones postraduccionales (PTM).Análisis mejorado de fosfopéptidos Se añadieron perlas Ti-IMAC a los péptidos trípticos para su enriquecimiento. Se inyectaron 500ng y se analizaron con un gradiente de 90 min utilizando métodos Orbitrap dependientes de datos. Muestra cortesía de Yuchen He, Coon Laboratories, University of Wisconsin-Madison.Cuantificar hasta 18 muestras con cobertura de >8.000 proteínas en <9 horasCélulas humanas fueron marcadas con reactivos TMTpro 18plex, combinadas, fraccionadas y posteriormente 12 fracciones de alto pH fueron analizadas usando un gradiente de 75 min con métodos de búsqueda en tiempo real SPS MS3. El Orbitrap Ascend Tribrid MS fue capaz de alcanzar la profundidad de la muestra de la cobertura del proteoma en un 30% menos de tiempo que el Orbitrap Eclipse Tribrid MS. Muestra cortesía de Steven Shuken, Qing Yu y Steven Gygi, Harvard Medical School.
ResumenEl cerebelo humano contiene más neuronas que cualquier otra región del cerebro y es un actor principal en el control motor. Los circuitos cerebelosos son únicos por su arquitectura estereotipada y su organización modular. Comprender los códigos motores que subyacen a la organización del movimiento de las extremidades y las reglas de procesamiento de señales aplicadas por los circuitos cerebelosos sigue siendo un reto importante para las próximas décadas. Uno de los déficits cardinales observados en los pacientes cerebelosos es la dismetría, que designa la incapacidad para realizar movimientos precisos. Los pacientes sobrepasan (hipermetría) o no alcanzan (hipometría) el objetivo durante tareas voluntarias dirigidas a un objetivo. Se revisan los mecanismos de la dismetría cerebelosa, haciendo hincapié en el papel de las vías cerebelosas en el control de aspectos fundamentales del control del movimiento, como la anticipación, la sincronización de las órdenes motoras, la sincronización sensoriomotora, el mantenimiento de las asociaciones sensoriomotoras y la sintonización de las magnitudes de las actividades musculares. Se ofrece una visión general de los avances recientes en nuestra comprensión de la contribución de los circuitos cerebelosos a la elaboración y conformación de las órdenes motoras, con una discusión sobre la anatomía relevante, los resultados de los estudios neurofisiológicos y los modelos computacionales que se han propuesto para aproximarse a la función cerebelosa.
