Osteoclasto Osteoblasto

Los osteoblastos son productos especializados y terminalmente diferenciados de las células madre mesenquimales[1]. Sintetizan colágeno denso reticulado y proteínas especializadas en cantidades mucho más pequeñas, como la osteocalcina y la osteopontina, que componen la matriz orgánica del hueso.

En grupos organizados de células desconectadas, los osteoblastos producen hidroxiapatita, el mineral óseo, que se deposita de forma muy regulada en la matriz orgánica formando un tejido mineralizado fuerte y denso, la matriz mineralizada. El esqueleto mineralizado es el principal soporte del cuerpo de los vertebrados que respiran aire. También es un importante almacén de minerales para la homeostasis fisiológica, incluyendo tanto el equilibrio ácido-base como el mantenimiento del calcio o el fosfato[2][3].

El esqueleto es un gran órgano que se forma y degrada a lo largo de la vida en los vertebrados que respiran aire. El esqueleto, a menudo denominado sistema óseo, es importante tanto como estructura de soporte como para el mantenimiento del calcio, el fosfato y el estado ácido-base en todo el organismo[4] La parte funcional del hueso, la matriz ósea, es totalmente extracelular. La matriz ósea está formada por proteínas y minerales. La proteína forma la matriz orgánica. Se sintetiza y después se añade el mineral. La mayor parte de la matriz orgánica es colágeno, que proporciona resistencia a la tracción. La matriz se mineraliza mediante la deposición de hidroxiapatita (nombre alternativo: hidroxiapatita). Este mineral es duro y proporciona resistencia a la compresión. De este modo, el colágeno y el mineral juntos forman un material compuesto con una excelente resistencia a la tracción y a la compresión, que puede doblarse bajo una tensión y recuperar su forma sin dañarse. Esto se denomina deformación elástica. Las fuerzas que superan la capacidad del hueso para comportarse elásticamente pueden provocar fallos, normalmente fracturas óseas.

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Osteoclastos

El tejido óseo está formado por osteoclastos, responsables de la resorción ósea, y osteoblastos y osteocitos, responsables de la formación ósea. Estos grupos celulares trabajan conjuntamente para mantener la resistencia y elasticidad del hueso.

El tejido óseo está formado por osteoclastos, responsables de la resorción ósea, y osteoblastos y osteocitos, responsables de la formación ósea. Estos grupos celulares trabajan conjuntamente para mantener la resistencia y la elasticidad del hueso.

El reactivo inductor de osteoblastos (para células animales) contiene un conjunto de reactivos de diferenciación de osteoblastos que incluyen hidrocortisona, beta-glicerofosfato y ácido ascórbico. Estos reactivos inducen la diferenciación eficiente de células madre derivadas de médula ósea y células madre derivadas de tejido adiposo (células madre mesenquimales) en osteoblastos cuando se añaden al medio de cultivo.

Este producto contiene un conjunto de reactivos inductores de osteoblastos, incluyendo hidrocortisona, β-glicerofosfato y ácido ascórbico. Estos reactivos inducen la diferenciación eficiente de células derivadas de la médula ósea y células madre derivadas del tejido adiposo (células madre mesenquimales) en osteoblastos cuando se añaden al medio de cultivo.

Células óseas

ResumenLos trastornos óseos hereditarios representan alrededor del 10% de los trastornos mendelianos documentados y se asocian a una elevada carga económica. Su estudio requiere osteoblastos, que desempeñan un papel fundamental en la regulación del desarrollo y el mantenimiento del tejido óseo. Sin embargo, no siempre se dispone de tejido óseo procedente de pacientes. Hemos desarrollado un método muy eficaz basado en el lisado de plaquetas para transdiferenciar directamente fibroblastos humanos derivados de la piel en células similares a los osteoblastos. Hemos caracterizado exhaustivamente nuestro modelo in vitro examinando la expresión de marcadores específicos de los osteoblastos durante el proceso de transdiferenciación, tanto a nivel de ARNm como de proteínas. Las células transdiferenciadas similares a osteoblastos mostraron un aumento significativo de la expresión de un panel de marcadores osteogénicos. También mostraron deposición mineral y actividad ALP, confirmando sus propiedades osteogénicas. El análisis RNA-seq permitió el estudio global de los cambios en el transcriptoma de las células transdiferenciadas. Los osteoblastos transdiferenciados también mostraron un enriquecimiento significativo en la expresión de genes relacionados con el desarrollo esquelético y la mineralización ósea. Nuestro modelo in vitro presentado puede contribuir potencialmente a la perspectiva de estudiar los trastornos dependientes de los osteoblastos en células derivadas de pacientes.

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Osteoblasto osteoclasto osteocito

Los osteocitos son las células óseas más abundantes del organismo, pero también las más difíciles de estudiar porque están incrustadas en una matriz mineralizada que dificulta su aislamiento. Esta línea celular MLO-A5 facilita el estudio de la función de los osteocitos.

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La salud en movimiento

Medio de proliferación: AlphaMEM (contiene L-glutamina y desoxirribonucleósidos); suplementado con 5% FBS y 5% CS, ambos inactivados por calor; penicilina-estreptomicina a 100U/ml-100ug/ml Medio de diferenciación: AlphaMEM (L-glutamina y desoxirribonucleósidos); suplementado con un 10% de FBS; penicilina-estreptomicina a 100U/ml-100ug/ml; aproximadamente 100µg/ml de ácido ascórbico y 4mM de β-glicerofosfato (ver Comentarios).

Mantener los cultivos madre en medio de proliferación en condiciones subconfluentes en placas recubiertas de colágeno a 37°C y al 5% de CO 2. Pasar a una dilución ~ 1:10 a 1:20 utilizando tripsina al 0,05%/0,53 mM EDTA cada 3-4 días (véase Rosser J. et al. Methods Mol Biol. 2012;816:67-81).

*La mineralización y la expresión génica pueden depender del Suero Fetal Bovino; puede ser necesario realizar pruebas y optimizar diferentes lotes/partidas de suero. La mineralización y la expresión génica pueden depender del CO2; puede ser necesario probar y optimizar con un 5-10% de CO2.